Pořízení Kisspeptin-10 pro výzkum

Endokrinologické laboratoře a pracoviště receptorové farmakologie používají Kisspeptin-10 jako pozitivní kontrolu, například k ověření, že buňky transfekované KISS1R dávají vápníkový nebo inositolfosfátový signál. Obvykle se dodává jako lyofilizovaný prášek v uzavřených lahvičkách. Protože existuje několik blízce příbuzných kisspeptinů a lidská a hlodavčí varianta se liší jednou aminokyselinou, zaslouží si dokumentace pozorné čtení.

Body, které je dobré s dodavatelem ověřit:

• Správný druh a délka: lidský Kisspeptin-10 je YNWNSFGLRF-NH₂. Dekapeptid hlodavců končí tyrozinem místo fenylalaninu a kisspeptiny-13, -14 a -54 jsou delší molekuly.
• C-koncový amid: certifikát by měl uvádět amidovaný konec. Varianta s volnou kyselinou je asi o jednu hmotnostní jednotku těžší a nejde o stejnou sloučeninu.
• Hmotnostní spektrometrie: naměřená hmotnost blízko 1 302 Da pro danou šarži, s přiloženým spektrem.
• Čistota HPLC pro šarži: chromatogram s uvedenou metodou, ne jedno číslo pro celou produktovou řadu.
• Obsah peptidu a protiion: jaký podíl prášku tvoří skutečně peptid a zda jde o trifluoroacetátovou, nebo acetátovou sůl, což může hrát roli v buněčných pokusech.
• Shodné doklady: stejné číslo šarže na certifikátu, etiketě lahvičky a bezpečnostním listu a etiketa s uvedením, že produkt je určen jen pro laboratorní výzkum.

Srovnání několika katalogů, například webu Peptides EU, ukazuje, jak různě dodavatelé prezentují výsledky analýz.

Kisspeptin-10 obsahuje tryptofan, který je citlivý na světlo a oxidaci, takže chladné, suché a tmavé skladování neotevřených lahviček pomáhá každou šarži zachovat. Mnoho skupin také novou šarži krátce ověří v receptorovém testu, než ji použije v dlouhém pokusu.