Obter Kisspeptin-10 para inves­ti­gação

Os laboratórios de endocrinologia e de farmacologia de recetores usam a Kisspeptin-10 como controlo positivo, por exemplo para confirmar que células transfetadas com KISS1R produzem um sinal de cálcio ou de fosfato de inositol. Costuma chegar como pó liofilizado em frascos selados. Como existem várias kisspeptinas muito próximas e as versões humana e de roedor diferem num resíduo, a documentação merece uma leitura cuidadosa.

Pontos a confirmar com o fornecedor:

• Espécie e comprimento corretos: a Kisspeptin-10 humana é YNWNSFGLRF-NH₂. O decapéptido dos roedores termina em tirosina em vez de fenilalanina, e as kisspeptinas-13, -14 e -54 são moléculas mais longas.
• Amida C-terminal: o certificado deve indicar a extremidade amidada. Uma versão com ácido livre pesa cerca de uma unidade de massa a mais e não é o mesmo composto.
• Espetrometria de massa: uma massa medida próxima de 1302 Da para esse lote concreto, com o espetro anexado.
• Pureza por HPLC desse lote: um cromatograma com o método indicado, e não um único valor para toda a gama.
• Teor de péptido e contraião: que parte do pó é realmente péptido e se se trata de um sal de trifluoroacetato ou de acetato, o que pode contar em ensaios celulares.
• Documentação coerente: o mesmo número de lote no certificado, no rótulo do frasco e na ficha de dados de segurança, e um rótulo com a indicação apenas para investigação laboratorial.

Mesmo quando um catálogo como www.peptides-eu.net indica um valor de pureza, vale a pena pedir o certificado do lote recebido.

A Kisspeptin-10 contém triptofano, sensível à luz e à oxidação, pelo que guardar os frascos fechados no frio, em local seco e ao abrigo da luz ajuda a preservar cada lote. Muitos grupos testam também brevemente um lote novo num ensaio de recetor antes de o usar numa experiência longa.